下面是小编为大家整理的重复字数,(22)(2022年),供大家参考。
维生素 C 浓度在 1.00-12.00μg·mL-1 范围内与吸收值呈良好的线性关系; 能预防牙龈出血及萎缩、提高人体免疫力,对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效[1]。维生素 C 的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光、2,6-二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、钼蓝比色法、原子吸收法、碘量法、电位滴定法、荧光光度法、毛细管电泳法[2~22] 等。其中原子吸收法、高效液相色谱法和荧光光度法仪器相对昂贵;碘量法和电位滴定法操作步骤较繁琐,而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。
电子天平.FA1604N,上海精密科学仪器有限公司;101-1 型电热恒温鼓风干燥箱,郑州宏朗仪器设备有限公司。
1.2 实验操作 1.2.1 维 C 标准溶液的配制 准确称取 0.010g 抗坏血酸,即得 100μg·mL-1 的维 C 标准溶液。
1.2.2 标准溶液最大波长吸收曲线 准确吸取 5ml 维 C 标准溶液于 50ml 比色管中,用二次蒸馏水稀释至刻度,混匀。用 1cm 石英比色皿,以二次蒸馏水为参比,在 200-280nm 波长范围内用紫外分光光度计自动扫描。绘制吸光度与波长的关系曲线,以最大波长为测定波长。并绘制最大波长吸收曲线。
1.2.3 标准曲线 准确吸取维 C 标准溶液 0.0ml、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL、4.5mL、5.0mL 于 50mL 容量瓶中,二次蒸馏水定容,混匀。
称取10.00g苹果果肉于研钵中,加10ml1%HCl,并研磨成匀浆。再转移到50ml容量瓶中,以二次蒸馏水定容,混匀。离心机离心 10min,吸取上清液,即上清液为待测苹果提取液。
1.2.5 样品吸光度的测定 1.2.5.1 待测苹果提取 1.2.5.2 碱处理苹果提取液 吸取 1.0ml 待测苹果提取液于 50ml 容量瓶中,再加入 10ml 二次蒸馏水和4ml1mol.L1NaOH, 待测苹果提取液的吸光度。即为苹果样品吸光度。
1.2.6 维 C 含量的计算
测得苹果样品的吸光度后,依据标准曲线方程,即可计算出苹果中维生素 C 的含量[mg.(100g)-1]。
维生素 C 含量=(C×V 总×V 待测总×100)/(V1×W 总×1000)
式中:C 为依标准曲线方程计算得到的维生素 C 浓度,μg·mL-1; V1 为测吸光度时吸取样品溶液的体积,mL; V 总为吸取样品定容总体积,mL; V 待测总为待测样品总体积,mL; W总为苹果质量,g; 2 结果与讨论 2.1 维生素 C 最大波长吸收曲线。(图 1)
由图 1 可知,在波长 200-280nm 范围内,维生素 C 有一最大吸收峰,最大吸收波长为 245nm,故本实验以 245nm 作为测定波长。
由图 2 可知,在 1.0-12.0μg·mL-1 浓度范围内,维生素 C 浓度与吸光度符合 朗 伯 - 比 尔 定 律 , 呈 良 好 的 线 性 关 系 。
所 得 线 性 回 归 方 程 为A=0.06398x+0.00491,相关系数 R2=0.9996。
2.3 静置时间 由于维生素 C 在碱性介质中不稳定、易分解,从而影响吸光度的测定。经试验发现苹果提取液在加碱后的静置时间与提取量有关。
3 结论 本实验利用维生素 C 具有对紫外产生吸收和对碱的不稳定的特性,建立了紫外分光光度快速测定苹果维生素 C 的方法。实验结果表明,维生素 C 浓度在1.0-12.0μg/mL 范围内与紫外吸收值呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.0630x+0.0049,相关系数 R2 =0.9996